一、植物组织蛋白质提取方法

1、根据样品重量（1g 样品加入 3.5ml 提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4 小时）。
3、用离心机离心 8000rpm40min4℃或 11100rpm20min4℃
4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml
1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml
2、甘油（Glycerol）75ml
3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g
这种方法针对 SDS-PAGE，垂直板电泳！

  二、植物组织蛋白质提取方法三氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积 3 倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上 1 小时）弃上清。
3、加入等体积的冰浴丙酮（含 0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上 1 小时），然后真空干燥沉淀，备用。
4、上样前加入裂解液，室温放置 30 分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离 心（15℃8000rpm 以上 1 小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在 4℃待用。
5、用 Brandford 法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。
  药品：提取液：含 10%TCA 和 0.07%的β-巯基乙醇的丙酮
  裂解液：2.7g 尿素 0.2gCHAPS 溶于 3ml 灭菌的去离子水中（终体积为 5ml），使用前再加入1M 的 DTT65ul/ml。这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！

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